使用活細胞直接進行RNA定序的方法

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RNA定序讓科學家可以研究細胞中基因的表達。由於信使RNA(mRNA)是從DNA基因經過轉譯作用(transcription)生成的,因此這個資訊可用於鑑別原始的基因序列,進而測量這些細胞中數千個基因(即轉錄組, transcriptome)的活性。RNA測序的挑戰是從細胞內混合的RNA中的特定細胞中捕捉到mRNA 。為此,科學家們開發了「單細胞RNA定序」(scRNA-seq),為基礎和生物醫學研究,甚至藥物開發提供了一個新方向。

現在,瑞士洛桑聯邦理工學院的研究團隊,開發出一種新技術,可以在定序過程中讓保持細胞存活,進而跟蹤數千個基因在一段時間內的活性,這種突破性的方法稱為Live-seq。Live-seq的技術關鍵是一種稱為“流體力顯微鏡”或FluidFM的顯微鏡技術。這種技術使用微觀通道 - 比人類頭髮更薄 - 因此可以將其插入單個細胞中,或者從單個細胞中提取包括mRNA在內的細胞質,而無需殺死它們。因此,Live-seq現在可以把細胞的固定時間內的轉錄組,與其後來的分子或表型行為聯繫起來,即在不同的時間點監測單個細胞中數千個基因的活性 - 即在“時間”上的轉錄組學分析。

研究人員指出,透過Live-seq,我們現在可以解決非常有趣和生物醫學相關的問題,例如為什麼某些細胞分化而其姐妹細胞沒有分化,或者為什麼某些細胞對抗癌藥物有抗藥性,而它們的姐妹細胞又不是。透過對Live-seq的測試,研究人員指出,它可以準確地識別(“分層”)不同的細胞類型和狀態,而不會引入嚴重的干擾。研究人員使用他們的新技術直接繪製個體免疫細胞(巨噬細胞)在變得活躍之前和之後的“軌跡”,以及脂肪基質細胞 - 一種幹細胞 - 在它們分化成脂肪細胞之前和之後。最後,研究小組也使用Live-seq作為「轉錄組學記錄儀」,這使他們能夠預測免疫細胞對免疫挑戰的反應有多強或多弱。

研究發表在本月的《自然》期刊。

 

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霧之舟

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